RPMI1640培養(yǎng)液（含HEPES，雙抗）

DMEM培養(yǎng)基是一種含各種氨基酸和葡萄糖的培養(yǎng)基，是在MEM培養(yǎng)基的基礎(chǔ)上研制的。與MEM比較增加了各種成分用量，同時又分為高糖型(低于4500mg/L)和低糖型(低于1000mg/L)。高糖型有利于細(xì)胞停泊于一個位置生長，適于生長較快、附著較困難腫瘤細(xì)胞等。

DMEM是 dulbecco's modified eagle medium的縮寫，所以其特點(diǎn)主要包括以下:(1)氨基酸含量為依格爾培養(yǎng)基的2倍，且含有非必需氨基酸，如甘氨酸等;(2)維生素含量為依格爾培養(yǎng)基的4倍;3)含有糖酵解途徑中的重要物質(zhì)--丙酮酸;(4)含有微量的鐵離子。
 

經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種，其中 DMEM、 RPMI 1640、 MEM 、 DMEM/F12 都是應(yīng)用廣泛的培養(yǎng)基。其他 如 M199 、 IMDM 、 L15培養(yǎng)基等也用于某些細(xì)胞的培養(yǎng)。其具體的特征及應(yīng)用如下：

1、BME細(xì)胞培養(yǎng)基

基礎(chǔ)Eagle培養(yǎng)基（Basal Medium Eagle），1955年Eagle設(shè)計(jì)，BSS＋12種氨基酸＋谷氨酰胺＋8種維生素。簡單、便于添加，適于各種傳代細(xì)胞系和特殊研究用，在此基礎(chǔ)上改良的細(xì)胞培養(yǎng)基品種有MEM、DMEM、IMDM等。

2、MEM細(xì)胞培養(yǎng)基

又稱*Eagle培養(yǎng)基（Minimal Essential Medium），1959年在Eagle's基礎(chǔ)培養(yǎng)基（BME）上修改而來，刪去賴氨酸、生物素，氨基酸濃度增加，適合多種細(xì)胞單層生長，有可高壓滅菌品種，是一種基本、試用范圍廣的培養(yǎng)基，但因其營養(yǎng)成分所限，針對生產(chǎn)之特定細(xì)胞培養(yǎng)與表達(dá)時，并不一定是使用效果佳或者經(jīng)濟(jì)的培養(yǎng)基。

3、DMEM細(xì)胞培養(yǎng)基

DMEM是由Dulbecco改良的Eagle培養(yǎng)基，起初是為小鼠成纖維細(xì)胞設(shè)計(jì)的。DMEM的氨基酸濃度是MEM的兩倍，維生素濃度是MEM的4倍，采用雙倍的HCO3-和CO2濃度起到更好的緩沖作用。初的配方中葡萄糖含量為1000 mg/L，后來為了某些細(xì)胞的生長需要，將葡萄糖含量又調(diào)整為4500 mg/L，這就是大家常說的低糖和高糖了。

低糖適于依賴性貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，特別適用于生長速度快、附著性較差的腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)。高糖更適合高密度懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，也適用于附著性較差，但又不希望它脫離原來生長點(diǎn)的克隆培養(yǎng)，也可用于雜交瘤中骨髓瘤細(xì)胞和DNA轉(zhuǎn)染的轉(zhuǎn)化細(xì)胞的培養(yǎng)。例如CHO細(xì)胞表達(dá)生產(chǎn)乙肝疫苗、CHO細(xì)胞表達(dá)EPO。

4、IMDM細(xì)胞培養(yǎng)基

Guilber 和Iscove將Dulbecco' Medium 改良為 Iscove's Medium，用于培養(yǎng)紅細(xì)胞和巨噬細(xì)胞前體。此種培養(yǎng)液含有硒、額外的氨基酸和維生素、丙酮酸鈉和HEPES。并用硝酸鉀取代了硝酸鐵。IMDM還能夠促進(jìn)小鼠B淋巴細(xì)胞，LPS刺激的B細(xì)胞，骨髓造血細(xì)胞，T細(xì)胞和淋巴瘤細(xì)胞的生長。IMDM為營養(yǎng)非常豐富的培養(yǎng)液，因此可以用于高密度細(xì)胞的快速增殖培養(yǎng)。

5、RPMI1640培養(yǎng)液（含HEPES，雙抗）

Moore等人于1967年在Roswell Park Memorial Institute研制，針對淋巴細(xì)胞培養(yǎng)設(shè)計(jì)，含BSS＋21種氨基酸＋維生素11種等?，F(xiàn)也用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，如哺乳動物、特殊造血細(xì)胞、正常或惡性增生的白細(xì)胞，雜交瘤細(xì)胞的培養(yǎng)，其它像K-562、HL-60、Jurkat、Daudi、IM-9等成淋巴細(xì)胞、T細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞以及HCT-15上皮細(xì)胞等均可參考使用。

6、HamF10細(xì)胞培養(yǎng)基

1963年Ham設(shè)計(jì)，含微量元素，可在血清含量低時用，適用于克隆化培養(yǎng)。F10適用于倉鼠、人二倍體細(xì)胞，特適于羊水細(xì)胞培養(yǎng)。

7、DMEM/F12細(xì)胞培養(yǎng)基

Ham's F12是為在低血清濃度下克隆CHO細(xì)胞而設(shè)計(jì)的，現(xiàn)在也廣泛應(yīng)用于克隆形成率的分析及原代培養(yǎng)。F12還可以與DMEM等體積混合使用，得到一種高濃度與成分多樣化相結(jié)合的產(chǎn)物，這種培養(yǎng)基已應(yīng)用于許多原代培養(yǎng)及更難養(yǎng)的細(xì)胞系的培養(yǎng)。由于營養(yǎng)成分豐富，且可以使用較少血清，故也常作為無血清培養(yǎng)基的基礎(chǔ)培養(yǎng)基。

8、M199細(xì)胞培養(yǎng)基

1950年Morgan等設(shè)計(jì)的具有確定化學(xué)成分的細(xì)胞培養(yǎng)液，即M-199。除BSS外，含有53種成分，為全面培養(yǎng)基，主要用于雞胚成纖維細(xì)胞培養(yǎng)。此培養(yǎng)液必須輔以血清才能支持長期培養(yǎng)。M-199可用于培養(yǎng)多種種屬來源的細(xì)胞，并能培養(yǎng)轉(zhuǎn)染的細(xì)胞?，F(xiàn)廣泛用于病毒學(xué)、疫苗生產(chǎn)。

9、McCoy5A培養(yǎng)基

1959年MeCoy為肉瘤細(xì)胞設(shè)計(jì)，BSS＋40種成分。可支持多種（如骨髓、皮膚、肺和脾臟等）的原代移植物的生長，除適于一般的原代細(xì)胞培養(yǎng)外，主要用于作組織活檢培養(yǎng)、一些淋巴細(xì)胞培養(yǎng)以及一些難培養(yǎng)細(xì)胞的生長支持。例如Jensen大鼠肉瘤成纖維細(xì)胞、人淋巴細(xì)胞、HT-29、BHL-100等上皮細(xì)胞。

10、L15 細(xì)胞培養(yǎng)基

L-15培養(yǎng)液適用于快速增殖瘤細(xì)胞的培養(yǎng)，用于在CO2缺乏的情況下培養(yǎng)腫瘤細(xì)胞株。此培養(yǎng)液采用磷酸鹽緩沖體系，氨基酸組成進(jìn)一步改良，并由半乳糖替代了葡萄糖。

RPMI1640培養(yǎng)液（含HEPES，雙抗）

至于選擇何種培養(yǎng)基并沒有一定的標(biāo)準(zhǔn)，有幾點(diǎn)建議可供參考：

(1)建立某種細(xì)胞株所用的培養(yǎng)基應(yīng)該是培養(yǎng)這種細(xì)胞的培養(yǎng)基。可以查閱參考文獻(xiàn)，或在購買細(xì)胞株時咨詢。也可以在一些生物公司的網(wǎng)站上搜索，如Invitrogen網(wǎng)站上有一個Cell Line Database的工具，選擇你感興趣的細(xì)胞類型，它就會彈出推薦的培養(yǎng)基、血清和轉(zhuǎn)染試劑等，有時還有優(yōu)化好的轉(zhuǎn)染步驟，很方便。

(2) 其它實(shí)驗(yàn)室慣用的培養(yǎng)基不妨一試，許多培養(yǎng)基可以適合多種細(xì)胞。

(3) 根據(jù)細(xì)胞株的特點(diǎn)